凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸硝化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收,再以标准酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法。
杜马斯燃烧法是将一定量的样品封装在铝舟中,然后在高温炉中进行燃烧;在催化剂和氧气的环境中,样品燃烧后生成的气体为:CO2、H2O、NOx;这些气体再经过还原炉后,NOx被还原为N2,而CO2和H2O分离开;后氮元素被热传导检测器(TCD)来测量出含量。全部测量过程在3分钟内完成。
两种方法的实验原理既有相同点,也有不同之处:
相同点:
两种方法都是基于食品中蛋白质含量与食品中氮含量的比例关系换算的。如乳中蛋白质与氮含量的比值为6.38,大豆中蛋白质与氮含量的比值为5.71,普通食品中蛋白质与氮含量的比值为6.25。因此,两种方法均是通过测定食品中氮含量后再根据换算系数得到食品中蛋白质含量。
不同点
凯氏定氮法:样品在高温浓硫酸的消化作用下,将样品中的有机氮转化为无机铵,待消化液冷却后,加入过量的碱,使无机铵转化为挥发性的氨,再将氨蒸出后,利用盐酸标准溶液滴定,后根据消耗的盐酸标液体积推算样品中的氮含量。
杜马斯定氮法:样品在高纯氧中充分燃烧的过程中,将氮元素转化为氮气或氮氧化物,再经过高温铜的还原,使所有的氮转化为N2,然后利用热导检测器检测N2的含量来推算样品中氮含量。因此杜马斯定氮法也称为杜马斯燃烧法或燃烧定氮法。
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