阳离子色谱柱是一种常用的色谱柱,主要用于对带正电荷的化合物进行分离和测定。它是指通过电荷相互作用和离子交换作用,在阳离子基质如硅胶、聚合物等上进行分离。下面将详细介绍阳离子色谱柱的作用、原理和选型标准。
一、作用
阳离子色谱柱主要用于分离和分析带正电荷的化合物。可以分离出氨基酸、肽类物质、药物,以及离子交换的阳离子染料等。此外,阳离子柱还是裂解产物、离子半胱氨酸等样品的分析测定的分离工具。
二、原理
阳离子色谱柱的分离原理主要基于荷电相互作用和离子交换作用。在正常相和酸性环境下,大多数化合物带有正电荷。当它们通过带有阴离子交换基团的阳离子基质时,它们将与交换基团发生亲和作用并停留在柱上。
分离的原理可以归纳为两个过程:
1.静电分离:分离物质在移动过程中相互间会与柱包涵的阴离子交换基团相互作用,即离子的静电交换作用。
2.吸附分离:以交换基团为基础,在表面上引力吸附某些分离物质与基质之间的作用力。
三、选型标准
在选择阳离子色谱柱时,需要考虑到不同样品和实验室需要的不同条件和目的,下面列举了一些选型的标准和方面:
1.样品类型:需要确定分离的目标分子是否带有正电荷,并且为了能保证分离的准确性,需要样品熔点和溶解性的一些基本参数,这将有助于选择适合的阳离子基质。
2.样品浓度:选型时需要根据样品的浓度选择不同的柱子,浓度越高则需要选择更高的分离效率柱子。
3.基质的密度、孔径大小和硬度:选择时需要考虑基质的密度,孔径大小和硬度是否均匀,这些都会直接影响到分离效果的好坏。
4.分离效率:具有高分离效率,可分离细碎的分子,对等环境的样品具有较弱的对色谱柱的影响。
5.选择适当的流动速度:在选择阳离子柱时还需要考虑样品所要求的流量和移向速度等物理参数,因为不适宜的流量和移向速度可能会严重影响分离率。